酶分子中能夠直接與底物分子結(jié)合,并催化底物化學(xué)反應(yīng)的部位,這一部位就成為酶的活性中心。

一般認為活性中心主要由兩個功能部位組成:第一個是結(jié)合部位,酶的底物靠此部位結(jié)合到酶分子上;第二個是催化部位,底物的鍵在此被打斷或形成新的鍵從而發(fā)生一定的化學(xué)變化。組成功能部位的是酶分子中在三維結(jié)構(gòu)上比較靠近的少數(shù)幾個氨基酸殘基或是這些殘基上的某些基團,它們在一級結(jié)構(gòu)上可能相距甚遠,甚至位于不同肽鏈上,而是通過肽鏈的盤繞、折疊在空間構(gòu)象上相互靠近;對于需要輔酶的酶來說,輔酶分子或輔酶分子的某一部分結(jié)構(gòu)也是功能部位的組成部分。

中文名

酶活性中心

外文名

active center

催化

底物化學(xué)反應(yīng)的部位

結(jié)合

酶分子中能夠直接與底物分子

信息

酶活性中心

概況

active center

基團

活性中心必需的基團有:組氨酸的咪唑基、谷氨酸天冬氨酸的側(cè)鏈羧基和絲氨酸的羥基。

鑒定方法

酶活性中心

化學(xué)修飾法

觀察酶分子被一定的化學(xué)試劑修飾前后酶活性的變化情況,結(jié)合其它方法,推斷該基團是否為活性中心的功能基團。如胰凝蛋白酶與二異丙基氟磷酸(DIFP)作用即會失去活性。DIFP能與酶分子中的Ser殘基共價結(jié)合,胰凝乳蛋白酶中有28個Ser殘基,而與DIFP作用的僅僅是其中的Ser195。這表明Ser 195是胰凝乳蛋白酶活性中心的組成部分。

親和標記法

是使用一個能與酶的活性中心特異結(jié)合的正常底物類似物作為活性部位基團的標記試劑。該類似物不能為酶所催化而發(fā)生化學(xué)反應(yīng),卻能與酶的特定基團發(fā)生共價結(jié)合使酶失活。如N-對-甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲基酮(TPCK)是胰凝乳蛋白酶的親和標記物,當用C14標記的TPCK與胰凝乳蛋白酶一起保溫時,酶即失活。結(jié)構(gòu)分析證明TPCK與酶分子中的His57發(fā)生作用。說明His57是活性中心的另一組成部分。

X-射線衍射分析法

可直接觀察酶與底物的結(jié)合情況。