放射免疫技術(shù)是基于競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)原理的放射免疫分析(RIA)。

基本介紹

放射免疫技術(shù)

一,原理及分類

二,常用的放射性核素

三,標(biāo)記物制備及鑒定

四,抗血清鑒定

第二節(jié)放射免疫分析

一,基本原理

二,實(shí)驗(yàn)方法及測(cè)定

第三節(jié)免疫放射分析

一,基本原理

二,IRMA與RIA的比較

思考題

小結(jié)

免疫技術(shù):以抗原-抗體反應(yīng)原理為基礎(chǔ),對(duì)樣品中相應(yīng)抗原或抗體進(jìn)行檢測(cè).

標(biāo)記技術(shù):將可被探測(cè)的示蹤物質(zhì)用化學(xué)方法與化合物連接.

標(biāo)記免疫分析:用可微量或超微量檢測(cè)的示蹤劑標(biāo)記抗原,抗體,檢測(cè)免疫反應(yīng)結(jié)果并確定待檢物.

標(biāo)記免疫技術(shù)-基本概念

常見標(biāo)記免疫技術(shù)

放射免疫技術(shù)

酶免疫技術(shù)

熒光免疫技術(shù)

第一節(jié)放射免疫技術(shù)

稍后又發(fā)展了非競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的免疫放射分析(IRMA).該類技術(shù)具有靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好,樣品及試劑用量少,操作簡(jiǎn)便且易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷領(lǐng)域中各種微量蛋白質(zhì),激素,小分子藥物和腫瘤標(biāo)志物的定量分析,對(duì)相關(guān)學(xué)科的發(fā)展起到了極大地推動(dòng)作用.

放射免疫

RIA

以標(biāo)記抗原與反

應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記

抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特

異性抗體來測(cè)定

待檢樣品中抗原

量.

免疫放射

IRMA

以過量標(biāo)記抗體

與抗原非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)

合,采用固相免

疫吸附載體分離

游離和結(jié)合標(biāo)記

抗體.

放射受體分析

RRA

放射配體結(jié)合

分析RBA

其它

一,放射免疫技術(shù)-原理及分類

二,放射免疫技術(shù)-常用的放射性核素

125I3H

射線γβ

理化性活潑差

核素豐度>90%-

半衰期60.2d12.3y

標(biāo)記方法簡(jiǎn)單復(fù)雜

標(biāo)記設(shè)備低廉昂貴

測(cè)量條件簡(jiǎn)單復(fù)雜

常用標(biāo)記核素

125碘-標(biāo)記物的制備-標(biāo)記

125I-

化學(xué)或酶促反應(yīng),將

放射性負(fù)電碘離子氧

化成碘原子或正電碘

離子,通過取代反應(yīng)

置換被標(biāo)記物分子中

酪氨酸或酪胺殘基以

及組胺殘基上的氫原

子.

125I或125I+

125I-標(biāo)記物

(混合物)

Ch-T,LPO氧化

取代反應(yīng)

直接標(biāo)記法

三,放射免疫技術(shù)-標(biāo)記物制備及鑒定

使用無還原劑的高比放射性碘源

被標(biāo)記物用量要少

ch-T用量要低

控制總反應(yīng)體積