SARS-CoV-2(新型冠狀病毒)
病原學(xué)檢測
1.實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測新型冠狀病毒核酸陽性;
2.病毒基因測序,與已知的新型冠狀病毒高度同源;
血清學(xué)檢測
1.新型冠狀病毒特異性IgM抗體和IgG抗體陽性;
2.新型冠狀病毒特異性IgG抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性或恢復(fù)期IgG抗體滴度較急性期呈4倍及以上升高。 (由于疫情隨時(shí)可能變化,具體請參考國家衛(wèi)健委,中國國家疾控中心相關(guān)診治方案)
MERS-CoV
中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-CoV)
病原學(xué)檢查主要包括病毒分離、病毒核酸檢測。病毒分離為實(shí)驗(yàn)室檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”。病毒核酸檢測可以用于早期診斷。檢測時(shí)應(yīng)及時(shí)留取多種標(biāo)本(咽拭子、鼻拭子、鼻咽或氣管抽取物、痰或肺組織,以及血液和糞便)進(jìn)行檢測,其中以下呼吸道標(biāo)本陽性檢出率更高。 1.病毒核酸檢測(PCR)。以RT-PCR(最好采用real-time RT-PCR)法檢測呼吸道標(biāo)本中的MERS-CoV核酸。
2.病毒分離培養(yǎng)??蓮暮粑罉?biāo)本中分離出MERS-CoV,但一般在細(xì)胞中分離培養(yǎng)較為困難。
SARS-CoV
嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS-CoV)
1.SARS-CoV RNA檢測:SARS-CoV RNA陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)為PCR檢測結(jié)果符合下列三項(xiàng)之一者可判斷為陽性。 (1)至少需要兩個(gè)不同部位的臨床標(biāo)本檢測陽性(例如鼻咽分泌物和糞便)。
(2)收集至少間隔2天的同一種臨床標(biāo)本送檢檢測陽性(例如2份或多份鼻咽分泌物)。
(3)在每一個(gè)特定檢測中對原臨床標(biāo)本使用兩種不同的方法,或從原標(biāo)本新提取RNA開始重復(fù)PCR檢測陽性。
PCR檢測結(jié)果的確認(rèn):①使用原始標(biāo)本重復(fù)PCR試驗(yàn);②在第二個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測同一份標(biāo)本。
2.SARS-CoV特異性抗原N蛋白檢測:定性檢測血清或血漿標(biāo)本中SARS-CoV核衣殼(N)抗原,用于SARS-CoV感染的早期輔助診斷。
3.SARS-CoV特異性抗體檢測:特異性抗體檢測診斷SARS標(biāo)準(zhǔn)為符合以下兩者之一即可診斷為SARS。
(1)平行檢測急性期血清抗體和恢復(fù)期血清抗體發(fā)現(xiàn)抗體陽轉(zhuǎn)。 (2)平行檢測急性期血清抗體和恢復(fù)期血清抗體發(fā)現(xiàn)抗體滴度升高≥4倍。 FeCV
貓冠狀病毒FeCV
貓傳染性腹膜炎(FIP)是目前導(dǎo)致貓死亡的重要原因之一。貓冠狀病毒FeCV(Feline enteric Coronavirus)是高度傳染性病毒而且偏好發(fā)生在數(shù)量及種類繁多而且養(yǎng)在一起的家養(yǎng)貓。FeCV是廣泛的貓冠狀病毒Feline Coronavirus(FCoV)中的一種。
樣品
需1ul血清或血漿,只能檢測貓的樣品。樣品可在2~8℃保存7天,如果需要更長的保存,樣品可保存在-20℃。嚴(yán)重紅細(xì)胞溶解或脂溶血會產(chǎn)生干擾的顏色,所以盡可能去得到更好質(zhì)量的樣品。 準(zhǔn)備洗滌液
讓洗滌濃縮液達(dá)到室溫,輕輕地倒置混勻。用蒸餾水或去離子水稀釋洗滌濃縮液(1份洗滌濃縮液加至9份水中),稀釋后的洗滌液可保存于2~7℃。 結(jié)果
a.檢測的有效性必須是:陽性質(zhì)控孔里的液體呈清晰的藍(lán)色,而陰性質(zhì)控孔里的液體保持清澈。
c.如果樣品孔里無顏色變化表明沒有感染FIP疾病。
以下內(nèi)容物包含在試劑盒里:
包被好的酶標(biāo)板8×12孔
陽性質(zhì)控血清1.5ml
陰性質(zhì)控血清7.0ml
蛋白A HRP標(biāo)記物5.0ml
濃縮洗滌液100.0ml
注意事項(xiàng)
*試劑盒使用前恢復(fù)至室溫(21~25℃)
*不同樣品使用不同的加樣器頭
*不要把試劑盒直接暴露在陽光下
*不要使用過期的試劑或不同試劑盒里試劑一齊混雜使用
*嚴(yán)格按照步驟操作,不適當(dāng)?shù)南礈旎蛟噭┪廴緦a(chǎn)生非專一性的顏色
*僅限獸醫(yī)使用
保存和穩(wěn)定性
將試劑盒和稀釋的洗滌液保存于2~7℃,不要冷凍。只要在適當(dāng)保存條件下,試劑在有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。