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大豆異黃酮
天然的癌癥化學(xué)預(yù)防劑
大豆異黃酮是黃酮類化合物，是大豆生長中形成的一類次級代謝產(chǎn)物，是一種生物活性物質(zhì)。由于是從植物中提取，與雌激素有相似結(jié)構(gòu)，因此大豆異黃酮又稱植物雌激素。大豆異黃酮的雌激素作用影響到激素分泌、代謝生物學(xué)活性、蛋白質(zhì)合成、生長因子活性，是天然的癌癥化學(xué)預(yù)防劑。
來源分布
大豆異黃酮(Soy Isoflavone)是一種植物化學(xué)素，屬植物黃酮類，主要來源于豆科植物的莢豆類，大豆中的含量較高，為0.1%-0.5%。主要是指3-苯并吡喃酮為母核的化合物，大豆中天然存在的大豆異黃酮總共有12種，可以分為3類，即黃豆苷類(Daidzingroups)、染料木苷類(Genistingroups)、黃豆黃素苷類(Glycitingroups)。每類以游離型、葡萄糖苷型、乙酰基葡萄糖苷型、丙二?；咸烟擒招偷?種形式存在。游離型的苷元(Aglycon)占總量的2%-3%，包括染料木黃酮(Genistein)、黃豆苷元(Daidzein)和黃豆黃素(Glycitein)。結(jié)合型的糖苷(Glycosides)占總量的97%-98%，主要以染料木苷(Genistein)和黃豆苷(Daidzin)及丙二酰染料木苷(6'-O-ma-1onylGenistin)和丙二酰黃豆苷(6'-O-malonyldaid-zin)形式存在，約占總量的95%。種植環(huán)境、加工方法、遺傳因素等對大豆異黃酮的含量和成分有一定影響，表現(xiàn)為不同大豆品種中異黃酮總量及各組分比例的差異。
具體結(jié)構(gòu)
物化性質(zhì)
藥理作用
預(yù)防心血管疾病
流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，長期攝食大豆制品的人群能延緩動脈硬化發(fā)生，減少血總膽固醇濃度，降低心臟病發(fā)病率。大豆異黃酮在心血管疾病中的作用機(jī)制是多元化的，較成熟的機(jī)制有抗氧化作用、受體調(diào)節(jié)、抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖、抗血栓生成作用等。大豆異黃酮可抑制酪氨酸激酶而降低血小板內(nèi)酪氨酸蛋白磷酸化，導(dǎo)致血小板活性降低，使其在血管壁上沉積和聚集減少，防止全身與動脈粥樣硬化有關(guān)的血栓形成。大豆異黃酮顯著抑制大鼠高脂飼料所致的血漿三酰甘油水平升高，而且對進(jìn)食高脂飼料引起的體內(nèi)過氧化物水平升高具有顯著拮抗作用。主要表現(xiàn)在降低肝臟及心肌中的自由基水平，升高肝臟超氧化物歧化酶(SOD)和肝臟及心肌中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性，減少血清及肝臟、心肌和主動脈中的總抗氧化產(chǎn)物含量。
防治婦女骨質(zhì)疏松
人們正在尋找一種新的治療骨質(zhì)疏松的藥物，大豆異黃酮是一種極具開發(fā)潛力的物質(zhì)，具有雌激素作用，而沒有使用雌激素的副作用。對于雌激素水平低者，大豆異黃酮表現(xiàn)為弱雌激素作用，與成骨細(xì)胞內(nèi)的雌激素受體結(jié)合，加強(qiáng)成骨細(xì)胞的活性，促進(jìn)骨基質(zhì)的產(chǎn)生、分泌和骨礦化過程，可預(yù)防骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生。研究結(jié)果表明，人體攝入較高及劑量的大豆異黃酮的大豆蛋白，可體高受試者腰椎骨的骨密度。
大豆異黃酮糖尿病
大豆異黃酮與腎病
近年來發(fā)現(xiàn)大豆異黃酮對腎病病人的腎功能呈現(xiàn)出一種有益的影響，這種效果與傳統(tǒng)上腎病忌食豆制品有一定的沖突，較難解釋。很多腎病如腎病綜合征可以并發(fā)高脂血癥，最常見的解釋是低白蛋白血癥刺激肝臟載脂B代償性合成增加，繼而產(chǎn)生過多LDL，引起高脂血癥。許多年前就有腎毒性學(xué)說，即血脂增高會促進(jìn)腎小球病變進(jìn)行性加重，這一點(diǎn)已得到證實(shí)。因此，降低血脂以保護(hù)腎功能，是腎病治療的一個很重要的組成部分，大豆異黃酮降血脂作用可以保護(hù)腎臟功能。還有報道大豆異黃酮在體外表現(xiàn)出利尿劑的生物活性，可以抑制Na+K+2Cl跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，保證有足夠的血流量，有利尿作用，對于離體的腎臟能松弛腎血管。因此，大豆異黃酮又可以防治腎病。
毒理作用
大豆異黃酮中的金雀異黃素屬于低毒物質(zhì)，其毒性主要表現(xiàn)為雌激素樣作用，可引起實(shí)驗(yàn)動物性早熟、假孕、胎盤吸收、死胎、流產(chǎn)及不育等生殖毒性作用，體重及器官重量下降，超大劑量時可引起動物死亡。給予新生或青春期前大鼠500mg/kg劑量的金雀異黃素，可促進(jìn)乳腺、子宮、卵巢的分化，乳腺重量增加。大豆異黃酮在發(fā)揮抗癌、抗動脈硬化、抗骨質(zhì)疏松等有益作用的同時，也會影響雄性動物的內(nèi)分泌，使其體內(nèi)激素水平發(fā)生改變，并產(chǎn)生實(shí)質(zhì)性的病理學(xué)變化，提示大豆異黃酮在發(fā)揮有益作用的同時對雄性動物生殖系統(tǒng)可能產(chǎn)生的不良作用不容忽視。新出生動物對金雀異黃素較為敏感的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，最近引起了人們對含大豆蛋白的嬰兒食品中異黃酮類物質(zhì)含量的極大關(guān)注和擔(dān)憂。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在5個嬰兒食品品牌的25個樣品中，異黃酮平均含量為32-47μg/ml。按4個月嬰兒飲食量計(jì)，平均暴露量為28-47mg/d或45-80mg/kg/d。7份嬰兒血漿樣品中金雀異黃素和大豆素平均濃度水平分別為684μg/L和295μg/L，是食用母乳或牛奶的嬰兒血漿中濃度水平的200多倍。這樣高的異黃酮水平對嬰兒會產(chǎn)生何種效應(yīng)還有待進(jìn)一步的追蹤研究。
原理及方法
原理
堿水解
酶催化水解
酶催化水解酶的專屬性很強(qiáng)，當(dāng)酶催化水解苷鍵時，條件溫和，只對鍵產(chǎn)生斷裂，苷元的結(jié)構(gòu)不被破壞，大豆異黃酮的苷鍵為B一葡萄糖苷鍵。
Smith降解法
該法是一種氧化開裂法，比酸水解溫和，能完整地保持苷元的結(jié)構(gòu)，先用NaIO將糖的二羥基氧化開裂為二元醛結(jié)構(gòu)，第二步用NaBH將二元醛結(jié)構(gòu)還原成二元醇結(jié)構(gòu)，第三步在室溫條件下與稀酸作用使其水解。
含量測定方法
紫外分光光度法
大豆異黃酮結(jié)構(gòu)中羥基和芳環(huán)形成較強(qiáng)的共軛體系，對紫外光有較強(qiáng)的特征吸收，所以可采用紫外分光光度法對大豆異黃酮進(jìn)行含量測定，該法具有方法簡便，重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，但特異性較差。
色譜法
（1）薄層掃描法
（2）高效液相色譜法
高效液相色譜法是目前測定大豆異黃酮研究工作中應(yīng)用最為廣泛的一種方法，此法具有測定樣品范圍廣、樣品制備步驟少、成本低、分離效率高、靈敏度好、測定結(jié)果準(zhǔn)確等特點(diǎn)，且有多種檢測器可供選擇。樣品多采用不同濃度的甲醇、乙醇直接提取、超聲或回流提取后用酸或酶水解后進(jìn)行測定，也有經(jīng)柱層析分離等方法。
（3）色相色譜法
氣相色譜法具有進(jìn)樣量少、高敏感性、高選擇性、高特異性等突出優(yōu)點(diǎn)，但在測定大豆黃素和金雀素時需制備衍生物，樣品制備步驟較多，耗時長且儀器較為昂貴，從而限制了該法的推廣應(yīng)用。
（4）毛細(xì)管電泳法
毛細(xì)管電泳法具有速度快、選擇性高、分離散率高，經(jīng)濟(jì)及樣品前處理簡單等優(yōu)點(diǎn)，已逐漸成為測定植物雌激素(尤其是大豆苷元和金雀異黃素)的常規(guī)方法之一。
（5）免疫檢測法
時間分辨熒光免疫分析法熒光免疫分析中的時間分辨測量技術(shù)，是為了提高免疫分析法靈敏度和特異性而發(fā)展起來的．測定中根據(jù)標(biāo)記物和干擾物熒光壽命的差異，選擇性的測定標(biāo)記物的熒光信號即為所謂的時間分辨測量技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸跗法經(jīng)典酶聯(lián)免疫分析法是一種基本的免疫鍘定方法，其主要的實(shí)驗(yàn)步驟可概括為包被、洗滌、與特異性抗體反應(yīng)、與酶抗抗體反應(yīng)、顯色和測定。
大豆異黃酮
參考資料
[1]
大豆異黃酮及其苷元的研究進(jìn)展 - 中國知網(wǎng) · 大豆異黃酮及其苷元的研究進(jìn)展 - 中國知網(wǎng)[引用日期2021-09-07]
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