豬圓環(huán)病毒（最小的動物病毒之一）

信息

豬圓環(huán)病毒（PCVPorcinecircovirus,）是迄今發(fā)現(xiàn)的最小的動物病毒之一。PCV2是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PostweaningMultisystemicWastingSyndrome,PMWS）,皮炎與腎病綜合征(PNDS)的主要病原，PMWS最早發(fā)現(xiàn)于加拿大。

豬圓環(huán)病毒

病理病因

豬圓環(huán)病毒

PCV對外界的抵抗力較強，在pH 3的酸性環(huán)境中很長時間不被滅活。該病毒對氯仿不敏感，在56 ℃或70 ℃處理一段時間不被滅活。在高溫環(huán)境也能存活一段時間。不凝集牛、羊、豬、雞等多種動物和人的紅細胞。

豬圓環(huán)病毒屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，病毒粒子大小為14～25nm，平均直徑17 nm，呈對稱的二十面體，無囊膜，基因組為單股環(huán)狀DNA，由脫氧核糖核酸組成，在組織中的懸浮密度為1.37 cm3，沉降系數(shù)為52S，是目前發(fā)現(xiàn)的最小的動物病毒。PCV的復(fù)制為滾環(huán)復(fù)制方式，先經(jīng)過一個雙鏈的復(fù)制型（RF），然后由雙鏈的復(fù)制型轉(zhuǎn)錄和編碼蛋白。這種復(fù)制方式與雞傳染性貧血病毒（CAV）的復(fù)制方式相同。

PCV對外界的抵抗力較強，該病毒對氯仿不敏感，不凝集牛、羊、豬、雞等多種動物和人的紅細胞。PCV能在RK-15細胞上生長，但不能引起細胞病變，但感染的PK—15細胞內(nèi)含有許多胞漿內(nèi)包涵體。少數(shù)感染的細胞內(nèi)含有核內(nèi)包涵體。PCV不能在原代胎豬腎細胞、恒河猴腎細胞、BHK—21細胞上生長。

根據(jù)致病性、抗原性和核酸序列的差異，將PCV分為PCV-1和PCV-2。PCV-1無致病性，1974年由德國學(xué)者Tischer從多株連續(xù)傳代的PK-15細胞中最先發(fā)現(xiàn)，1982年證實該病毒來源于當初制備PK-15細胞的豬腎組織。后來證實該病毒只是一種可以感染豬的常規(guī)病毒，不會對感染豬造成危害。PCV-2卻具有致病性，能引起豬表現(xiàn)多種臨床癥狀。PCV-1基因組全長1759bp，PCV-2全長1768 bp或1767 bp，二者序列同源性小于80%，但PCV-1毒株間的核酸序列同源性大于99%，PCV-2毒株間的核序列同源性大于96%。

PCV-1與PCV-2都有讀碼框ORF1，編碼病毒復(fù)制蛋白。各毒株間的ORF1編碼蛋白質(zhì)序列間源性大于86%，在PCV各讀碼框編碼的蛋白質(zhì)中間源性最高?，F(xiàn)已經(jīng)證實，PCV有兩個主要的閱讀框，ORF1和ORF2，二者在長度上都大于600 bp⑵。ORF1是最大的閱讀框，編碼病毒的復(fù)制蛋白（Rep），分子量大小為37KDa，與病毒的復(fù)制轉(zhuǎn)錄有關(guān)。ORF2編碼病毒的結(jié)構(gòu)蛋白，可以與PCV-2的抗血清反應(yīng)，LiuQ等研究表明，位于12-18位及34-41位的氨基酸殘基對PCV2-ORF2是重要的。ORF2編碼蛋白（Cap）的兩個抗原表位分別位于所編碼的氨基酸的69-83處和117-131處，這兩處對Cap蛋白特異的。

發(fā)病機制

在病豬鼻黏膜、支氣管、肺臟、扁桃體、腎臟、脾臟和小腸中有PCV粒子存在。胸腺、脾、腸系膜、支氣管等處的淋巴組織中均有該病毒，其中肺臟及淋巴結(jié)中檢出率較高。表明PCV嚴重侵害豬的免疫系統(tǒng)：病毒與巨噬細胞/單核細胞、組織細胞和胸腺巨噬細胞相伴隨，導(dǎo)致患豬體況下降，形成免疫抑制。

由于免疫抑制而導(dǎo)致免疫缺陷，其臨床表現(xiàn)為：對低致病性或減弱疫苗的微生物可以引發(fā)疾病；重復(fù)發(fā)病對治療無應(yīng)答性；對疫苗接種沒有充分免疫應(yīng)答；在一窩豬中有一頭以上發(fā)生無法解釋的出生期發(fā)病和死亡；豬群中同時有多種疾病綜合征發(fā)生。這些特征在PMWS的豬群中基本上都有不同程度的發(fā)生。

淋巴細胞缺失和淋巴組織的巨噬細胞浸潤，是PMWS病豬的獨特性病理損害和基本特征。而且此特征與血液循環(huán)中B及T細胞減少和淋巴器官中這類細胞的減少呈高度相關(guān)；與周圍血液和淋巴組織中巨噬細胞/單核細胞譜系細胞的增加呈高度相關(guān)。另外已證實淋巴組織、相關(guān)免疫細胞和血液中的細胞存在大量的PCV2抗原。

流行病學(xué)

PMWS是最早被認識和確認的由PCV2感染所致的疾病。常見的PMWS主要發(fā)生在5～16周齡的豬，最常見于6～8周齡的豬，極少感染乳豬。一般于斷奶后2～3天或1周開始發(fā)病，急性發(fā)病豬群中，病死率可達10%，耐過豬后期發(fā)育明顯受阻。但常常由于并發(fā)或繼發(fā)細菌或病毒感染而使死亡率大大增加，病死率可達25%以上。血清學(xué)調(diào)查表明，PCV在世界范圍內(nèi)流行。

在德國和加拿大，豬群中PCV抗體陽性率分別高達95%和55%，在英國和愛爾蘭，豬群中PCV抗體陽性率分別高達86%和92%，但不一定表現(xiàn)PMWS癥狀。在中國對部分省市豬群檢測，20日齡未斷奶仔豬陽性率為0，1～2月斷奶仔豬陽性率為16.5%，后備母豬陽性率為42.3%，經(jīng)產(chǎn)母豬陽性率為85.6%，肥育豬陽性率為51%，總陽性率為42.9%。臨床癥狀可能在幾個月內(nèi)持續(xù)存在，在6～12個月達到高峰，接著下降；一群與另一群之間的感染有很大差別，因為乳豬體內(nèi)母源的PCV抗體在其出生后8～9周齡時消失，而小豬轉(zhuǎn)移到育肥圈時（11～13周齡）又接觸了PCV，PCV抗體又出現(xiàn)了。

傳播途徑

懷孕母豬感染PCV2后，可經(jīng)胎盤垂直傳播感染仔豬。人工感染PCV2血清陰性的公豬后精液中含有PCV2的DNA，說明精液可能是另一種傳播途徑。用PCV2人工感染試驗豬后，其他未接種豬的同居感染率是100%，這說明該病毒可水平傳播。豬在不同豬群間的移動是該病毒的主要傳播途徑，也可通過被污染的衣服和設(shè)備進行傳播。

工廠化養(yǎng)殖方式可能與本病有關(guān)，飼養(yǎng)管理不善、惡劣的斷奶環(huán)境、不同來源及年齡的豬混群、飼養(yǎng)密度過高及刺激仔豬免疫系統(tǒng)均為誘發(fā)本病的重要危險因素，但豬場的大小并不重要。

PCV感染試驗動物，發(fā)現(xiàn)只有豬產(chǎn)生特異性抗體，而兔、鼠、牛，甚至人均為血清學(xué)陰性。

PCV1對豬無致病性，但能產(chǎn)生血清抗體，并且在調(diào)查的豬群中普遍存在。

PCV2可引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS），并多發(fā)于5～16周齡的豬。

PCV能水平傳播，接觸病毒后一周，血清中能檢出抗體，隨后滴度不斷升高。

臨床癥狀

PMWS的臨床癥狀

最常見的是豬只漸進性消瘦或生長遲緩，這也是診斷PMWS所必需的臨床依據(jù)，其他癥狀有厭食、精神沉郁、行動遲緩、皮膚蒼白、被毛蓬亂、呼吸困難，咳嗽為特征的呼吸障礙。較少發(fā)現(xiàn)的癥狀為腹瀉和中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂。發(fā)病率一般很低而病死率都很高。體表淺淋巴結(jié)腫大，腫脹的淋巴結(jié)有時可被觸摸到，特別是腹股溝淺淋巴結(jié)；貧血和可視黏膜黃疸。在一頭豬可能見不到上述所有臨床癥狀，但在發(fā)病豬群可見到所有的癥狀。胃潰瘍、嗜睡、中樞神經(jīng)系統(tǒng)障礙和突然死亡較為少見。絕大多數(shù)PCV2是亞臨床感染。一般臨床癥狀可能與繼發(fā)感染有關(guān)，或者完全是由繼發(fā)感染所引起的。在通風不良、過分擁擠、空氣污濁、混養(yǎng)以及感染其他病原等因素時，病情明顯加重，一般病死率為10%～30%。

先天性顫抖的癥狀

顫抖由輕微到嚴重不等，一窩豬中感染的數(shù)目也變化較大。嚴重顫抖的病仔豬常在出生后1周內(nèi)因不能吮乳而饑餓致死。耐過1周的乳豬能存活，3周齡時康復(fù)。顫抖是兩側(cè)性的，乳豬躺臥或睡眠時顫抖停止。外部刺激如突然聲響或寒冷等能引發(fā)或增強顫抖。有些豬一直不能完全康復(fù)，整個生長期和育肥期繼續(xù)顫抖。發(fā)病窩豬常為新引入的年輕種豬所生，這表明這些血清學(xué)陰性種豬在懷孕的關(guān)鍵期接觸了PCV。

常見的混合感染

PCV感染可引起豬的免疫抑制，從而使機體更易感染其他病原，這也是圓環(huán)病毒與豬的許多疾病混合感染有關(guān)的原因。最常見的混合感染有PRRSV、PRV（偽狂犬病毒）、PPV(細小病毒）、肺炎支原體、多殺性巴氏桿菌、PEDV（流行性腹瀉病毒）、SⅣ（豬流感病毒），有的呈二重感染或三重感染，其病豬的病死率也將大大提高，有的可達25%～40%。

病理變化

剖檢病變

本病主要的病理變化為患豬消瘦，貧血，皮膚蒼白，黃疸（疑似PMWS的豬有20%出現(xiàn)）；淋巴結(jié)異常腫脹，內(nèi)臟和外周淋巴結(jié)腫大到正常體積的3～4倍，切面為均勻的白色；肺部有灰褐色炎癥和腫脹，呈彌漫性病變，比重增加，堅硬似橡皮樣；肝臟發(fā)暗，呈淺黃到橘黃色外觀，萎縮，肝小葉間結(jié)締組織增生；腎臟水腫（有的可達正常的5倍），蒼白，被膜下有壞死灶；脾臟輕度腫大，質(zhì)地如肉；胰、小腸和結(jié)腸也常有腫大及壞死病變。

組織學(xué)病變

病變廣泛分布于全身器官、組織，廣泛性的病理損傷。肺有輕度多灶性或高度彌漫性間質(zhì)性肺炎；肝臟有以肝細胞的單細胞壞死為特征的肝炎；腎臟有輕度至重度的多灶性間質(zhì)性腎炎；心臟有多灶性心肌炎。在淋巴結(jié)、脾、扁桃體和胸腺常出現(xiàn)多樣性肉芽腫炎癥。PMWS病豬主要的病理組織學(xué)變化是淋巴細胞缺失。

疾病診斷

本病的診斷必須將臨床癥狀、病理變化和實驗室的病原或抗體檢測相結(jié)合才能得到可靠的結(jié)論。最可靠的方法為病毒分離與鑒定。

病理學(xué)檢查

此法在病豬死后極有診斷價值。當發(fā)現(xiàn)病死豬全身淋巴結(jié)腫大，肺退化不全或形成固化、致密病灶時，應(yīng)懷疑本病?？梢娏馨徒M織內(nèi)淋巴細胞減少，單核吞噬細胞類細胞浸潤及形成多核巨細胞，若在這些細胞中發(fā)現(xiàn)嗜堿性或兩性染色的細胞質(zhì)內(nèi)包涵體，則基本可以確診。

血清學(xué)檢查

是生前診斷的一種有效手段。診斷本病的方法有：間接免疫熒光法（ⅡF），免疫過氧化物單層培養(yǎng)法，ELISA方法，聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）方法，核酸探針雜交及原位雜交試驗（ISH）等方法。

ⅡF方法 宜檢測細胞培養(yǎng)物中的PCV。用組織病料以蓋玻片在PK-15細胞培養(yǎng)，丙酮固定，用兔抗PCV高免血清與細胞培養(yǎng)物中的PCV反應(yīng)，可對PCV進行檢測和分型。

ELISA診斷方法 可用于檢測血清中的病毒抗體。用細胞培養(yǎng)的病毒(PCV2）作為抗原，用PCV2特異性單克隆抗體作為競爭試劑建立競爭ELISA方法，競爭ELISA方法的檢出率為99.58%，而間接免疫熒光法的檢出率僅為97.14%。該方法可用于PCV2抗體的大規(guī)模監(jiān)測。

PCR方法 是一種快速、簡便、特異的診斷方法。采用PCV2特異的或群特異的引物從病豬的組織、鼻腔分泌物和糞便進行基因擴增，根據(jù)擴增產(chǎn)物的限制酶切圖譜和堿基序列，確認PCV感染，還有一種簡單的復(fù)合PCR(multiplex PCR）法。

ISH方法 此法可以檢查PCV核酸。但不能區(qū)分PCV1和PCV2，具有群特異性，可以精確定位PCV在組織器官中的部位，可用于檢測臨診病料和病理分析。

臨床診斷要點

⑴PMWS主要發(fā)生在5～16周齡的豬，斷奶前生長發(fā)育良好。⑵同窩或不同窩仔豬有呼吸道癥狀，腹瀉、發(fā)育遲緩、體重減輕。有時出現(xiàn)皮膚蒼白或黃疸。抗生素治療無效或療效不佳。⑶剖檢淋巴結(jié)腫大，脾腫、肺膨大，間質(zhì)變寬，表面散在大小不等的褐色突變區(qū)。其他臟器也可能有不同程度的病變和損傷。

防御機制

本病無有效的治療方法，加上患豬生產(chǎn)性能下降和高死亡率，使本病顯得尤為重要。而且因為PCV2的持續(xù)感染，使本病在經(jīng)濟上具有更大的破壞性?？股氐膽?yīng)用和良好的管理有助于解決并發(fā)感染的問題。

加強飼養(yǎng)管理

降低飼養(yǎng)密度、實行嚴格的全進全出制和混群制度、減少環(huán)境應(yīng)激因素、控制并發(fā)感染、保證豬群具有穩(wěn)定的免疫狀態(tài)、加強豬場內(nèi)部和外部的生物安全措施、購豬時保證豬來自清潔的豬場是預(yù)防控制本病、降低經(jīng)濟損失的有效措施。專利消毒劑Virkon S在1∶250稀釋消毒時能有效的殺滅圓環(huán)病毒，因此可將其應(yīng)用于每批豬之間的終端消毒。

做好豬主要傳染病的免疫工作

PCV2與其相關(guān)豬病的發(fā)生還需要另外的條件或共同因素才得誘發(fā)臨床癥狀。世界各國控制本病的經(jīng)驗是對共同感染源作適當?shù)闹鲃用庖吆捅粍用庖?，所以做好豬場豬瘟、豬偽狂犬病、豬細小病毒病、氣喘病和藍耳病等疫苗的免疫接種，確保胎兒和吮乳期仔豬的安全是關(guān)鍵。因此根據(jù)不同的可能病原和不同的疫苗對母豬實施合理的免疫程序至關(guān)重要。

人工被動免疫

可采取血清療法。從豬場的育肥豬采血（健康的淘汰種豬血最好），分離血清，給斷乳期的仔豬腹腔注射。

自家疫苗的使用

豬場一旦發(fā)生本病，可把發(fā)病豬的內(nèi)臟加工成自家疫苗，據(jù)臨床實踐，效果不錯。但現(xiàn)階段有兩種觀點：一是母豬和斷奶仔豬同時免疫，優(yōu)點是免疫效果快，基本在1～2月內(nèi)能控制本病；缺點是如果滅活不徹底，將使本病長期存在。二是只免疫斷奶仔豬，優(yōu)點是免疫安全性好，基本不會使本病長期存在；缺點是免疫效果慢，需要半年左右的時間才能控制本病。

“感染”物質(zhì)的主動免疫

“感染”物質(zhì)指本豬場感染豬的糞便、死產(chǎn)胎豬、木乃伊胎等，用來喂飼母豬，尤是初產(chǎn)母豬在配種前喂給，能得到較好的效果。如有一定抗體的母豬在懷孕80天以后再作補充喂飼，則可產(chǎn)生較高免疫水平，并通過初乳傳遞給仔豬。這種方法，不僅對防制本病、保護胎豬和吮乳豬的健康有效，而且對其他腸道病毒引起的繁殖障礙也有較好的效果。但使用本法要十分慎重，如果場內(nèi)有小豬會造成人工感染。

藥物預(yù)防

預(yù)防性投藥和治療，對控制細菌源性的混合感染或繼發(fā)感染，是非?？扇〉摹５侵两馪CV2引起相關(guān)豬病的病原和機制尚未完全了解，因此還不能完全依賴特異性防制措施，只能同時開展有效的綜合性措施，才能收到事半功倍的效果。

仔豬用藥：哺乳仔豬在3、7、21日齡注射3次得米先（長效土霉素，200 mg/mL，每次0.5 mL），或者在1、7日齡和斷奶時各注射速解靈（頭孢噻呋，500 mg/mL)0.2 mL；斷奶前1周至斷奶后1個月，用支原凈（50 mg/kg)+金霉素或土霉素或強力霉素（150 mg/kg）拌料飼喂，同時用阿莫西林（500 mg/L）飲水。

母豬用藥：母豬在產(chǎn)前1周和產(chǎn)后1周，飼料中添加支原凈（100 mg/kg)+金霉素或土霉素（300 mg/kg）。

綜合防制計劃

分娩期：仔豬全進全出，兩批豬之間要清掃消毒；分娩前要清洗母豬和治療寄生蟲；限制交叉哺乳，如果確實需要也應(yīng)限制在分娩后24小時以內(nèi)。

斷乳期：豬圈小，原則上一窩一圈，豬圈分隔堅固；堅持嚴格的全進全出，并有與鄰舍分割的獨立糞尿排出系統(tǒng)；降低飼養(yǎng)密度：>0.33 m2/豬；增加喂料器空間：>7 cm/仔豬；改善空氣質(zhì)量：NH3<10×10-6，CO2<0.1%，相對濕度<85%；豬舍溫度控制和調(diào)整：3周齡仔豬為28 ℃，每隔一周調(diào)低2 ℃，直至常溫；批與批之間不混群。

生長育肥期：豬圈小，壁式分隔；堅持嚴格的全進全出、空欄、清洗和消毒制度；從斷奶后豬圈移出的豬不混群；整個育肥圈豬不再混群；降低飼養(yǎng)密度：>0.75 m2/豬；改善空氣質(zhì)量和溫度。

其他：適宜的疫苗接種計劃；保育舍要有獨立的飲水加藥設(shè)施；嚴格的保健措施（斷尾、斷齒、注射時嚴格消毒）；將病豬及早移到治療室或撲殺。

防治措施

實驗獸醫(yī)生物安全措施：認真地對待引種工作，引種不慎往往是暴發(fā)疫情的主要原因。引進的后備母豬應(yīng)進行嚴格的檢疫，所購買的種公豬、精液必須無Ⅱ型圓環(huán)病毒感染。

改進飼養(yǎng)管理，減少應(yīng)激，合理配制日糧。注意通風與保暖，保持豬舍干燥，改善豬舍的空氣質(zhì)量，降低氨氣濃度。去勢和注射須遵循良好的衛(wèi)生和消毒習慣。

在豬場內(nèi)禁養(yǎng)貓、犬，定期驅(qū)蚊蠅、投餌滅鼠。搞好種豬群的凈化，堅持自繁自養(yǎng)。定期監(jiān)測，合理制訂免疫程序，避免過早或過多地對仔豬免疫，減少各種應(yīng)激因素對仔豬的影響。

在豬Ⅱ型圓環(huán)病毒易感期最好不注射應(yīng)激較大的疫苗，如仔豬副傷寒疫苗、口蹄疫疫苗、氣喘病疫苗等，某些可以靠藥物預(yù)防的細菌性傳染病，如豬丹毒、豬肺疫、豬鏈球菌病、仔豬副傷寒等，可以暫停疫苗注射。